Anahtar Kelimeler
sıvı-sıvı ekstraksiyon
katı faz ekstraksiyon
idrar
gaz kromatografi kütle spektrometri
Nasıl Atıf Yapılır
Öz
Amaç: Günümüzde kötüye kullanılan yasadışı maddeler arasında en yaygın kullanılan madde esrardır. Esrarın saptanmasına yönelik yapılan çalışmalarda, idrarda ana metaboliti olan THC-COOH’un kat-faz (SPE) ve sıvı-faz (ELE) ekstraksiyon teknikleri ile analizi yer almaktadır. Bu çalışmanın amacı, sentetik idrar örneklerinde THC-COOH analizi için GC-MS ile tayini öncesinde SPE ve LLE metodlarını kullanarak örnekleri analize hazırlamak ve bu yöntemlerin örnek hazırlamadaki verimleri ve etkinlikleri karşılaştırmaktır. Aynı zamanda bu yöntemlerin tekrarlanabilirlik, seçimlilik, doğruluk, kesinlik ve doğrusallık gibi validasyon parametreleri inceleyerek yöntem geçerliliğini değerlendirmektir.
Gereç ve Yöntem: Ana standart olarak (±)-ll-nor-9-carboxy-A9-THC ve iç standart olarak (±)-ll-nor-9-carboxy-A9-THC-D3 kullanılmıştır. LLE için Toxi-tube B, SPE için Clean Screen THC kartuşları kullanılmıştır. Türevlendirme için BSTFA+%1 TMCS kullanılmıştır. Analizler Thermo Finnigan Trace Gaz Kromatografisi-Kütle Spektrometrisi (GC-MS) cihazı ile yapılmıştır. SPE ve LLE metodlarının karşılaştrılması Minitabll istatistik paket programı ile yapılmıştır.
Bulgular: Çalışmamızda en düşük tayin sınırı olarak (LOD) 2 pg/L elde edilmiştir. Elde edilen sonuçlarda geri kazanım değerleri %90’nın üzerinde ve %RSD değerleri %10’nun altında bulunmuştur. 25-500 pg/L arasındaki konsantrasyonlarda kantitatif tayin yapılabilmesi için gerekli olan doğrusallığın var olduğu tespit edilmiştir. Uygulanan Anderson-Darling testi ile LLE ve SPE sonuçlarının normal bir dağılıma uymadığı görüldüğünden non-parametrik test olan Wilcoxon signed-rank testi uygulanmıştır.
Sonuç: Çalışmamızda bulunan doğrusallık, tekrarlanabilirlik ve geri kazanılabilirlik değerleri, biyoanalitik validasyon kriterleri doğrultusunda kabul edilebilir düzeyde bulunmuştur. Elde edilen istatiksel sonuçlara göre, LLE ve SPE metodları arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunmuştur (p<0.005). Yapılan çalışma ile analiz öncesinde örnekhazırlamabasamağının önemi gösterilmiştir.
Anahtar Kelimeler: TCH_COOH, Sıvı-Sıvı Ekstraksiyon, Katı Faz Ekstraksiyon, İdrar, Gaz Kromatografi Kütle Spektrometri.
Referanslar
Verstraete AG, Legrand SA, Vandam L, Hughes B, Griffiths P. Drug Use, Impaired Driving and Traffic Accidents. 2nd Edition. Lisbon, 2014:50-100.
Mule SJ, Casella GA. Confirmation of Marijuana, Cocaine, Morphine, Codeine, Amphetamine, Methamphetamine, Phencyclidine by GC/MS in Urine Following Immunoassay Screening, J. Anal. Toxicol. 1988;12(2):102-107.
Saito K, Saito R, Kikuchi Y, Iwasaki Y, Ito R, Nakazawa H. Analysis of drugs of abuse in biological specimens. J. Health Sci. 2011;57:472–487. https://doi.org/10.1248/jhs.57.472
Akgür SA, Coşkunol H, editors. Bağımlılık Yapan Maddeler ve Toksikolojisi. İzmir:Ege Üniversitesi Basımevi, 2014:211.
Moeller M, Kraemer T. Drugs of Abuse Monitoring in Blood for Control of Driving Under the Influence of Drugs. Ther Drug Monit. 2002;24(2):210-221. https://doi.org/10.1097/00007691-200204000-00003
Yavuz O, Aksoy A. Örnek hazırlamada katı faz ekstraksiyonu metodu. F.Ü. Sağlık Bil. Dergisi. 2006;20(3):259-264.
Raharjo TJ, Verpoorte R. Methods for the Analysis of Cannabinoids in Biological Materials: a Review. Phytochem Anal.2004;15:79-83. https://doi.org/10.1002/pca.753
Yedekci A, Onur E. Bağımlılık yapıcı ilaçlar ve tayin yöntemleri. Türk Klinik Biokimya Derg, 2010;8(3):125-130.
Huq S, Dixon A, Kelly K, Kallury KMR. Novel solid-phase extraction protocol for 11-nor-9-carboxy-9-tetrahydrocannabinol from urine samples employing a polymeric mixed-mode cation-exchange resin, Strata-X-C, suitable for gas chromatography–mass spectrometry or liquid chromatography–mass spectrometry analysis. J. Chrom. A. 2005;1073:355–361.
Robandt PV, Klette KL, Sibum M. Automated solid-phase extraction-liquid chromatography-tandem mass spectrometry analysis of 11-nor-Delta9-tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid in human urine specimens: application to a high-throughput urine analysis laboratory. J Anal Toxicol. 2009;33(8):456-460. https://doi.org/10.1093/jat/33.8.456
Strano-Rossi S, Bermejo AM, de la Torre X, Botrè F. Fast GC-MS method for the simultaneous screening of THC-COOH, cocaine, opiates and analogues including buprenorphine and fentanyl, and their metabolites in urine. Anal Bioanal Chem. 2011;399(4):1623-30. https://doi.org/10.1007/s00216-010-4471-4
Abraham TT, Lowe RH, Pirnay SO, Darwin WD, Huestis MA. Simultaneous GC-EI-MS Determination of Δ9-Tetrahydrocannabinol, 11-Hydroxy-Δ9-Tetrahydrocannabinol, and 11-nor-9-Carboxy-Δ9-Tetrahydrocannabinol in Human Urine Following Tandem Enzyme-Alkaline. J Anal Toxicol. 2007;31(8):477–485. https://doi.org/10.1093/jat/31.8.477
Kintz P, Mangin P, Simultaneous determination of opiates, cocaine and major metabolites of cocaine in human hair by gas chromotography/mass spectrometry (GC/MS). Forensic Sci. Int. 1995;73(2):93–100.
Tiryaki O. Pestisit kalıntı analizlerinde kalite kontrol (QC) ve kalite güvencesi (QA). Nobel yayın dağıtım, Ankara, 2011:91-107.
Causon R, Validation of chromatographic methods in biomedical analysis. Viewpoint and discussion. J. Chromatogr. B 1997; 689:175–180.
Peters FT, Maurer HH Bioanalytical method validation and its implications for forensic and clinical toxicology - A review [review]. Accred.Qual.Assur., 2002; 7:441-449.
Dergimiz ve bu internet sitesinin tüm içeriği Creative Commons Attribution (CC-BY) lisansının şartları ile ruhsatlandırılmıştır. Creative Commons Attribution Lisansı, kullanıcıların bir makaleyi kopyalamasına, dağıtmasına ve nakletmesine, makaleyi uyarlamasına ve makalenin ticari olarak kullanılmasına imkan tanımaktadır. CC BY lisansı, yazarına uygun şekilde atfedildiği sürece açık erişimli bir makalenin ticari ve ticari olmayan mahiyette kullanılmasına izin vermektedir.